【硕士】聚氨酯固定化粪链球菌制备L-瓜氨酸的研究

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内容简介

　　【硕士】聚氨酯固定化粪链球菌制备L-瓜氨酸的研究　　授予学位：硕士　　学位授予单位：北京化工大学　　学位年度：2011　　 瓜氨酸作为-种非蛋白质氨基酸，在尿素循环中起着重要的作用。本文建立了使用聚氨酯固定化粪链球菌制备L-瓜氨酸的方法，并研究了反复批次发酵以及填充床中连续转化生产L-瓜氨酸的生产工艺，最后使用光谱法研究了L-瓜氨酸与牛血清白蛋白的相互作用。建立了-套成本低，产量高，生产简便，产品质量高的路线，为今后工业化生产L-瓜氨酸奠定了基础。　　 本文首先考察了使用聚氨醋固定化粪链球菌(Streptococcus faecalisBT001)的可行性。实验表明，经过多次洗涤后，固定化菌体量可达0.632g}g，效果良好，确定粪链球菌与聚氨酯载体有较好的生物相容性。　　 进-步设计了一系列实验对固定化的影响因子进行了考察，当聚氨酯添加量为1.0g，尺寸为5*5*5mm，培养基pH值为7.0，摇床温度为35 C ,转速为150rmizi，经过52h达到最大吸附量。同时确定了在摇床中固定化细胞转化制备L-瓜氨酸的最适条件:摇瓶装液量为5OmL/250mL，加入0.6g固定化细胞，底物100g}L-的L-精氨酸，表面活性剂CTAB 0.3g.L-,起始pH为7.0，摇床转速为100r.miri,温度为35 0C的条件下转化36h,L-瓜氨酸产量最大可达到53g.L。得到的固定化细胞可重复使用5个批次，大大缩短了转化时间。　　 本实验还考察了固定化细胞在填充床反应器中制备L-瓜氨酸的工艺过程。在规格为，40X300反应柱中装有固定化细胞26g，反应液含100g.L的L-精氨酸，0.3mo1.L，的醋酸缓冲液，0.3g.L的表面活性剂CTAB，调节pH值为7.0，设定流速为40mL.h，恒温水槽35℃的条件下，固定化细胞在填充床反应器中可连续使用巧次，L-瓜氨酸的产量基本维持在65g.L左右。　　 最后，本文采用荧光碎灭法以及紫外吸收差谱法研究了L-瓜氨酸与牛血清白蛋白在不同pH值下的相互作用机制，并利Stern-Volmer方程求解出各种参数。　　

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